Научно-исследовательская лаборатория микологического мониторинга и биологии грибов (референс-лаборатория). Лаборатория микологии

История

С момента создания НИО глубоких микозов в его состав входила микологическая лаборатория, сотрудники которой занимались изучением биологических особенностей патогенных грибов. В 1988 году была организована лаборатория морфологии, объединившая специалистов- микологов и патоморфологов с целью комплексного исследования тканевых и культуральных форм возбудителей микозов. В 1998 лаборатория была преобразована в НИЛ морфологии и биологии грибов, руководителем которой была назначена к.б.н. Н. В. Васильева. Приказом ректора ГОУ ДПО СПб МАПО № 110 от 20.06.2005 г. на базе НИЛ морфологии и биологии грибов была создана Научно-исследовательская лаборатория микологического мониторинга и биологии грибов (референс-лаборатория). Среди сотрудников, работавших в НИЛ в предшествующий период, были известные специалисты - микологи, как проф. В. Б. Антонов, к.б.н. Г. И. Горшкова, к.м.н. М. А. Михайлова и др.

1 ряд (слева направо): н.с. Маметьева А.А., проф. Елинов Н.П., проф. Васильева Н.В., зав. НИЛ Богомолова Т.С., н.с. Павлова И.Э., 2 ряд (слева направо): зав. РКПГ Чилина Г.А., врач-лабораторный миколог Босак И.А., н.с. Выборнова И.В., н.с. Доршакова Е.В.

Задачи научных исследований биологической лаборатории грибов:

1. Изучение экологии грибковых патогенов и условных патогенов в различных географических регионах. 2 .Создание референтных штаммов микромицетов - патогенов и условных патогенов -чувствительных и резистентных в антимикотикам. 3. Изучение микобиоты в жилых помещениях, в медицинских и других учрежденияхс определением её морфолого - физиологических особенностей. 4. Токсигенные грибы и микотоксикозы - возбудители, индуцируемые ими патологические процессы у пациентов. Характеристика микотоксинов и оценка их вкладов в патогенез разных микозов у людей и животных. 5 . Мониторинг грибов в процессах биоразрушения различных объектов, и определения их доли и роли в ассоциациях с другими организмами. Подбор соответствующих биоцидов и рекомендации по их использованию на практике. 6 . Штрих - кодирование избранных тест - культур с использованием ДНК микромицетов и последующим её секвенированием (совместная работа с НИЛ молекулярно -генетической микологии).

В референс-лаборатории микологического мониторинга и биологии грибов выделено несколько направлений работы

Изучение морфолого-биологических свойств микроскопических грибов (микромицетов) - возбудителей заболеваний у человека Основные научные исследования направлены на изучение штаммовых различий грибов - возбудителей заболеваний у человека по морфологическим и биологическим свойствам, в том числе и признакам патогенности. В настоящее время в качестве возбудителей микозов у человека известно около 500 видов микромицетов. Ежегодно появляются новые патогены, меняется этиологическая структура инвазивных и поверхностных микозов, что создаёт трудности в их диагностике и лечении. С 2010 года в лаборатории проводят видовую идентификацию культур грибов не только традиционными методами (по морфологическим и физиологическим свойствам), но и методом ДНК - секвенирования в тесном контакте с НИЛ молекулярно - генетической микологии.

В лаборатории начаты уникальные исследования токсигенности грибов - возбудителей микотоксикозов.

- «Факторы патогенности Cryptococcus neoformans и их роль в патогенезе криптококкоза» (директор НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Васильева Н.В.; научный консультант д.б.н., проф. Елинов Н.П.)

- «Сравнительная характеристика природных и клинических изолятов Cryptococcus neoformans » (аспирант Босак И.А.; научный руководитель д.б.н., проф. Васильева Н.В.). Криптококкоз чаще развивается у ВИЧ-инфицированных больных (75%), характеризуется хроническим течение и высокой частотой резистентности (66%) возбудителя к вориконазолу invitro. Установлены природные резервуары этого возбудителя в Санкт-Петербурге - отложения голубиного помёта на чердаках жилых домов. Исследованы факторы патогенности и вирулентность изолятов, выделенных от больных и из голубиного помёта. Установлено, что штаммы C. neoformans варьируют по вирулентности, биологическим свойствам и генотипу. Исследование соответствует международному уровню состояния проблемы.

- «Клинико-лабораторные варианты хронического аспергиллёза лёгких» (аспирант Борзова Ю.В.; научные руководители д.б.н., проф. Васильева Н.В., д.м.н., проф. Климко Н.Н.). Изучена этиология, определены факторы риска развития хронического инвазивного аспергиллёза легких. Оценены клинические и лабораторные характеристики заболевания и диагностическая значимость серологического метода выявления галактоманнана в сыворотке крови; выявлена низкая диагностическая ценность общепринятых микологических обследований у больных хроническим и острым инвазивным аспергиллезом легких. Определено, что возбудители инвазивного аспергиллёза легких чувствительны in vitro к вориконазолу, итраконазолу и позаконазолу.

- «Особенности диагностики и лечения онихомикоза при псориазе» (врач КДО Свиридова К.В.; научные руководители: д.м.н., проф. Корнишева В.Г., д.б.н., проф. Васильева Н.В.).

Мониторинг чувствительностимикроскопических грибов к антимикотикам

Мониторинг чувствительности и резистентности микромицетов к антимикотикам и дезинфектантам - важнейшее направление деятельности лаборатории. В лаборатории впервые проведено проспективное исследование чувствительности дрожжевых организмов - возбудителей инвазивных и поверхностных микозов, выделенных от больных в Санкт - Петербурге, к наиболее распространённым антимикотикам, применяемым для лечения: флуконазолу и вориконазолу. Работа была частью Международного многоцентрового исследования ARTEMISDisk.

В рамках Международного научного исследования SCAREStudy начато изучение резистентности возбудителей аспергиллёза к азолам: итраконазолу, вориконазолу, позаконазолу. Изучено 38 изолятов Aspergillus spp. Выявлено 3 штамма, резистентных к азолам.

Диссертационные исследования, проводимые с участием сотрудников лаборатории по темам:

- «Мониторинг чувствительности дрожжей, выделенных от пациентов в Санкт- Петербурге» (научный сотрудник НИЛ микологического мониторинга и биологии грибов Выборнова И.В.; научный руководитель д.б.н., проф. Васильева Н.В.) За 5 лет изучено более 2000 штаммов возбудителя. Отмечено возрастание частоты микозов, обусловленных не-albicans видамиCandida , в том числе C. guilliermondii. Показано снижение доли чувствительныхк флуконазолу штаммов среди возбудителей кандидоза.

Изучение микромицетов - контаминантов и биодеструкторовпомещений

Микроскопические грибы, присутствующие в воздухе больничных помещений, в воздухе сырых жилых помещений и развивающиеся в строительных материалах и конструкциях производственных (в том числе медицинских) и жилых зданий, обуславливают профессиональные и бытовые микозы, а также нозокомиальные микозы и микоаллергозы. Это аспергиллез бронхов и лёгких, микогенная аллергия, аллергический бронхолёгочный аспергиллёз, экзогенный альвеолит, мукороз, пенициллиоз и др. микозы органов дыхания, индуцируемые микромицетами. Сотрудники лаборатории осуществляют микологический мониторинг больничных, жилых, служебных и производственных помещений, разрабатывают меры борьбы с биодеструкцией зданий, обусловленной микроскопическими грибами. При обследовании помещений с нарушенным температурно - влажностным режимом (подвергшихся протечкам, затоплению после пожара, с отсутствием гидроизоляции и т.п.) специалисты лаборатории выявляют очаги биоповреждений, отбирают пробы воздуха, соскобы и смывы с поражённых поверхностей. По результатам микологического исследования образцов выдаётся заключение о количестве обнаруженных микроскопических грибов, их видах и потенциальной опасности для здоровья.

Диссертационные исследования, проводимые с участием сотрудников лаборатории по темам:

- «Микромицеты - контаминанты больничных помещений» (аспирант Суханова Ю.А.; научный руководитель д.б.н., проф. Васильева Н.В.). Получены новые данные о распространённости и источниках условно - патогенных грибов в больничных зданиях, выявлен широкий спектр грибов - контаминантов воздуха - причинных факторов внутрибольничных микозов, микоаллергозов и микотоксикозов.

- «Микогенная аллергия у жителей помещений, поражённых микромицетами»

(ассистент кафедры клинической микологии, аллергологии и иммунологии Козлова Я.И.; научные руководители: д.б.н., проф. Васильева Н.В., д.м.н., проф. Н.Н. Климко).

Установлено, что факторами развития микогенной аллергии являются признаки плесневого поражения и определённая концентрация спор микромицетов в воздухе. Предложено предельное значение концентрации грибных спор в воздухе для своевременного принятия мер по эрадикации грибов и снижения заболеваемости, связанной с присутствием плесени.

- «Микроорганизмы - биодеструкторы больничных зданий» (научный сотрудник НИЛ микологического мониторинга и биологии грибов Павлова И.Э.; научный руководитель д.б.н., проф. Васильева Н.В.). Выявлены основные причины биодеструкции возводимых и эксплуатируемых больничных зданий, в частности применении негрибостойких строительных материалов.

Достижения

    Определен спектр чувствительности к флуконазолу и вориконазолу 2400 штаммов дрожжей, выделенных от больных в Санкт-Петербурге. Выявлена тенденция к росту числа нечувствительных к флуконазолу возбудителей инвазивного кандидоза. Выявлен основной природный резервуар возбудителя криптококкоза в Санкт-Петербурге. Проведено сравнительное изучение биологических свойств природных и клинических изолятов Cryptococcus neoformans. Установлены распространённость и источники возбудителей инвазивного аспергиллёза в больницах Санкт-Петербурга. Выявлен спектр возбудителей онихомикоза стоп в различных федеральных округах России. Установлен спектр грибов - биодеструкторов жилых и больничных зданий. Определены причины биоповреждений и меры борьбы с грибковой контаминацией помещений.

Изучена противогрибковая активность основных строительных биоцидов и дезинфектантов. Показана негрибостойкость некоторых строительных материалов.

    На базе НИЛ выполнены и защищены 4 диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук и 1 диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук. За 2006-2010 г.г. опубликовано 127 печатных работ, сделано 57 докладов на Российских и международных научных конференциях.

Учебно-методическая работа

Сотрудники лаборатории принимают участие в повышении квалификации слушателей кафедры микробиологии и микологии, оказывают консультативную помощь.

Диагностическая работа

Лаборатория в качестве референтной, оказывает консультативно - диагностическую помощь ЛПУ города и России по вопросам диагностики микозов и идентификации возбудителей, используя методики международного уровня и в соответствии с международными стандартами.

Зав. лабораторией к.б.н. Т.С. Богомолова проводит микроскопические и культуральные исследования патологического материала на грибы. Микроскопические исследования осуществляются с помощью световой и люминесцентной микроскопии.

Проводятся исследования чувствительности к антимикотикаммикроскопических грибов - возбудителей заболеваний.

Лаборатория выполняет договорные исследования по следующим направлениям:

  1. Микологические исследования помещений различного назначения. По результатам микологического исследования образцов выдаётся заключение о количестве обнаруженных микроскопических грибов, их видах и потенциальной опасности для здоровья. Эта работа проводится как в рамках по научно - исследовательской тематики, так и по Испытательному лабораторному центру.
  2. Исследование грибостойкости материалов, в том числе строительных.
  3. Определение противогрибковой активности лекарственных средств, новых химических субстанций, парфюмерно-косметических изделий, дезинфектантов.
  4. Определение чувствительности определённых грибов к лекарственным препаратам, новым субстанциям, дезинфектантам.
  5. Испытание новых приборов (устройств) для противогрибковой обработки.

Публикации

    Васильева Н.В., Разнатовский К.И., Котрехова Л.П., Богомолова Т.С., Пупкова М.А., Пинегина О.Н., Чилина Г.А., Босак И.А., Кубасова Н.А., Белоусова Ж.А., Кулешова Л.В., Жуковский Р.О., Грязева Т.М., Владимирова И.С., Цветкова М.Г., Монашкова М.Л., Холонай Н.Н., Стойко А.А., Клюева Т.А., Сажина В.В. Этиология онихомикоза стоп в г. Санкт-Петербурге и г. Москве. Результаты проспективного открытого многоцентрового исследования. // Проблемы медицинской микологии. - 2009. - Т.11, № 2. - с.14-18. Выборнова И.В., Васильева Н.В., Босак И.А. Мониторинг чувствительности возбудителей кандидоза к флуконазолу //Проблемы медицинской микологии. - 2010. - Т.12, № 2. - c.73. Козлова Я.И., Н.В.Васильева, Г.А.Чилина, Т.С.Богомолова, О.В.Аак, Н.Н.Климко. Микогенная аллергия у жителей помещений, пораженных микромицетами //Проблемы медицинской микологии. - 2008. - Т.10, № 2. - с.17-21. Корнишева В.Г., Васильева Н.В., Богомолова Т.С., Гудкова Ю.И. Диссеминированный кожно-лимфатический споротриксоз у больной с хроническим идиопатическим миелофиброзом // Проблемы медицинской микологии. -2009. - Т.11, № 2. - с.19-23. Павлова И.Э. Биоповреждения в больничных зданиях //Проблемы медицинской микологии. - 2008. - Т.10, № 1. - с.35-39. Цинзерлинг В.А., Аравийский Р.А., Васильева М.В., Фомин Ю.А., Додонов К.Н. Наблюдение аспергиллёзного сепсиса при ВИЧ-инфекции в стадии СПИД // Проблемы медицинской микологии. - 2008. -Т.10, № 4. - с.6-8.

Работа с живыми патогенными грибами и актиномицетами в лаборатории требует большой четкости и осторожности.

Микологические лаборатории должны иметь изолированное помещение.

Работу следует проводить в чистых боксах.

Все манипуляции с культурами мицелиальной фазы, а также изучение мицелиальной фазы, а также изучение выживаемости патогенных грибов и актиномицетов во всех фазах проводят в герметическом боксе, с фильтрационной системой, включающей фильтрацию воздуха, поступающего в бокс и выходящего из него через фильтры.

Работу в боксе проводят в костюме III типа с ватно – марлевой системой.

До начала работы, но не позже чем за 15 минут, в боксе включают бактерицидные лампы и вакуум – насос. Если во время работы в боксе прекращается отсос воздуха, работу немедленно прекращают.

По завершении работы предметы, находящиеся в боксе, а также внутренние стены бокса, обрабатывают одним из дезинфицирующих раствором путем орошения до сплошного смачивания всей поверхности. После этого включают на 15 – 20 минут бактерицидную лампу и только после этого бокс разгружают.

После разгрузки бокс облучают бактерицидной лампой еще раз в течение 30 минут при работающей фильтро – вентиляционной системе.

По окончании работы в боксе, сотрудники моют руки в перчатках в дезинфицирующем растворе, выходят в преддушевую, где снимают халат, косынку, маску. Помещают их в соответствующие биксы для автоклавирования или в растворы для последующей дезинфекции или кипячения и проходят санобработку в душе.

Посевы в металлических емкостях помещают в термостаты, а материал для обеззараживания погружают в проверенные на целостность металлические бачки с крышками.

Посевы мицелиальных культур в боксах делают после предварительного внесения в пробирки или матрацы физиологического раствора или бульона.

При работе с мицелиальными фазами грибов или актиномицетов, во избежание заражения аэрогенным путем, агаровые чашки Петри с посевами выдерживают в термостате не более пяти суток (до начала спороношения).

Просмотр посевов с мицелиальными фазами грибов актиномицетов проводят в обычной боксовой комнате в костюме III типа с маской.

Работу с дрожжевыми фазами грибов проводят в обычной боксовой комнате в костюме III типа с маской.

Серологические исследования проводят в костюме IV типа с ватно – марлевой повязкой.

При проведении серологических исследований в микологической лаборатории обязательно предварительное обеззараживание исследуемого материала путем автоклавирования или добавления 0,5 – 1,0% формалина С последующим выдерживанием не менее двух суток при 37 градусах и проверкой на стерильность.

Исследуемые сыворотки перед постановкой серологических реакций прогревают при 56 градусах 30 минут, затем добавляют мертиолат (1: 10000) и исследуют после этого не ранее чем через 24 часа.

С целью получения антигенов, вакцин и проведения других работ, выращенную при определенных условиях грибницу обеззараживают автоклавированием при 0,5 ат в течение 30 минут дважды, если работают с кокцидиозным грибом и один раз, если работают с возбудителями гистоплазмоза и бластомикоза.

Дрожжевые фазы возбудителей гистоплазмоза и бластомикозов, мицелиальные фазы кокцидиозного гриба, возбудителей гистоплазмоза и бластомикозов можно обеззараживать добавлением 0,5% формалина.

Для проверки грибной массы или фильтратов на стерильность делают посев их по 0,5 мл в пробирки с сахарным мясо – пептонным агаром и бульоном, плотной и жидкой среды Сабуро.

Посевы выдерживают в течение 10 суток при 28 и 37 градусах. До получения результатов контрольного посева, взвеси и фильтраты хранят при 4 градусах.

Остатки патологического материала, неиспользованные культуры грибов, актиномицетов, загрязненные этими микробами посуда и пипетки обязательно автоклавируют.

Отработанные препараты погружают в 10% раствор хлорамина и тщательно промывают после кипячения. Посуду с живыми культурами дезинфицируют 5% фенолом или 10% хлорамином в течение одного часа с последующей влажной уборкой помещений дезинфицирующими средствами и УФ- облучением стен и воздуха помещений в течение 1 – 1,5 часа.

Загрязненные живыми грибами или актиномицетами руки моют с мылом, протирают спиртом и тщательно споласкивают водой.

При травматическом повреждении кожи, порезах, попадании загрязненного материала на слизистую глаза немедленно проводят лечебно – профилактическое мероприятие.

Работу, связанную с заражением животных и их исследованием, а также с другим заразным материалом, проводят в блоке для инфицированных животных, в котором предусматривается помещение для настольного бокса и санпропускник.

При работе с животными используются костюмы I – II типа с ватно – марлевой маской.

Заражение животных возбудителями глубоких микозов в мицелиальной фазе, а также вскрытие этих животных проводят во вскрывочной, интраназальное заражение – в настольном боксе с фильтро – вентиляционной системой.

Перед заражением животных и после него место введения материала обрабатывают 1% настойкой йода.

Исследование проб почвы, гнезд грызунов, помета птиц и пр. проводят в боксе с фильтро – вентиляционной системой.

По окончании работы с зараженными животными и другим материалом, руки в перчатках моют в одном из дезинфицирующих растворов. Защитную одежду снимают в преддушевой и обеззараживают.

После этого сотрудники проходят санобработку.

Трупы павших или забитых животных обеззараживают автоклавированием, кипячением, сжиганием или помещают в баки с дезинфицирующим раствором на одни сутки.

Посуду, применяемую при работе с членистоногими, дезинфицируют кипячением. Отходы заливают дезинфицирующими растворами или сжигают, инструменты кипятят или обжигают в огне.


Это компетентная профессиональная организация квалифицированных специалистов, проводящая исследования и диагностику высокого качества в сфере вирусных, грибковых, бактериальных инфекций. Микробиологические исследования осуществляются в рамках научного подхода современными методами. Выбор метода зависит от специфики задач, поставленных перед специалистом.

Проводит специальные исследования, позволяющие определять содержание различных микроорганизмов и микроэлементов в исследуемом объекте. Исследования проводятся в специальных лабораторных условиях компетентными, дипломированными специалистами, с помощью технических средств и соответствующего современного оборудования.


Объектами лабораторного микробиологического исследования являются органические субстанции и вещества. Один из решающих факторов исследования - это отбор проб для лабораторного анализа. Отбор производится компетентными специалистами с соблюдением необходимых правил и нормативов. Специфика отбора проб определяется особенностями исследуемого объекта, это может быть вода, почва, воздух, и другие вещества.


Микробиологические лабораторные исследования имеют широкое применение для выяснения микроэлементарного состава материалов, сред, веществ и диагностики различных заболеваний. В этом ракурсе лабораторные исследования, как правило, проводятся относительно воздуха и воды, которые исследуются на эпидемиологическую безопасность, ведь воздух и вода - это оптимальная среда размножения и обитания огромного количества патогенных организмов.


Патогенные организмы, содержащиеся в воздухе и воде, способны вызвать при контакте с человеком широкий спектр заболеваний, лабораторные микробиологические исследования позволяют выявить опасные микроорганизмы и принять меры для их устранения.


Большую роль микробиологическая лаборатория играет в контроле и анализе пищевой продукции на ее качество и безопасность. Опытные исследователи лаборатории определяют наличие патогенных организмов в пище, с помощью новейших автоматизированных систем. Проводятся исследования неспецифической микрофлоры пищевой продукции, которая случайно попадает на продукты из окружающей среды.


Степень загрязненности продуктов питания посторонней микрофлорой зависит от ряда факторов, это: правильность заготовки пищевого продукта и технологий последующей обработки, правильность транспортировки и хранения, реализации и соблюдение санитарного режима на всех остальных этапах.


Лаборатории, проводящие микробиологические исследования, имеют определенный набор помещений в соответствии с номенклатурой проводимых исследований и производственной мощностью, где особым образом проведено электричество, вентиляция, водопровод и отопление. В системе водоснабжения, например, предусматривается раздельная подача воды для бытовых нужд и для лабораторных исследований.

Лаборатории имеют «чистую» и «грязную» зоны. Грязная зона включает помещения для регистрации и приема материала, боксы для проведения исследований, автоклавную для обеззараживания материалов, термостатную. Вытяжная вентиляция грязной зоны оборудуется фильтрами тонкой очистки воздуха, выбрасываемого лабораторией.


Чистая зона включает комнаты отдыха, гардероб для верхней одежды, комнаты для работы с документацией и клиентами, подсобные помещения, помещения с холодильниками для хранения продуктов питания и диагностических препаратов.


Это специализированная организация, проводящая важные исследования по контролю и обеспечению безопасности окружающей среды и человека, осуществляющая широкий круг всевозможных исследований с помощью высококлассного оборудования и дипломированных компетентных специалистов.

Устройство вирусологической лаборатории:

Вирусологические лаборатории должны размещаться в отдельном здании или изолированном блоке не выше второго этажа и обязательно иметь два входа: один для персонала, второй для поступления материала для исследования;

Помещения в вирусологической лаборатории должны быть расположены так, чтобы обеспечить поточность продвижения поступившего на исследование материала;

Помещения лаборатории должны быть разделены на зоны: «чистая зона», «заразная зона», «заразный» блок, блок помещений для работы с лабораторными животными (виварий).

В «чистой» зоне размещают помещения административно-бытовые, вспомогательно-подготовительные, кладовые. Работа в этих помещениях не связана с вируссодержащим материалом. В «заразной» зоне проводится работа с вирусами III-IV группе патогенности.

В заразной зоне находятся помещения для индикации и идентификации вирусов. «Заразный» блок является строго изолированной группой помещений, сообщающийся с остальными помещениями «заразной» зоны через санитарный шлюз (помещения для переодевания и обработки защитной одежды) и передаточный шлюз (для прохождения материала).

В «заразной» зоне располагаются помещения: для приготовления культуры ткани; для индикации и идентификации респираторных вирусов; для исследования крови на краснуху и паротит; для индикации и идентификации энтеральных ротавирусов; для исследований по санитарной вирусологии; для исследований на вирусный гепатит; для серологических исследований; для проведения исследований с использованием ИФА; для индикации и идентификации арбовирусов.

Каждое помещение «заразной» зоны состоит из рабочей комнаты и боксов с предбоксником для работы с культурой ткани. Боксы должны располагаться смежно с рабочей комнатой и сообщаться с последнеей через предбоксник:

Помещения для подготовки лабораторной посуды включают: моечную, стерилизационную, препараторскую, автоклавную;

Виварий следует разместить в отдельно стоящем здании и оборудовать двумя входами: один - для персонала, другой - для поступления лабораторных животных;

Лаборатории должны быть обеспечены вентиляцией, канализацией, энергопитанием, централизованным отоплением, иметь достаточное естественное и искусственное освещение. Стены должны быть облицованы глазуревой плиткой на высоту 1,5 м или выкрашены масляной краской, полы покрыты плиткой или линолеум, боксы и предбоксники оборудованы автономной приточно-вытяжной вентиляцией;

Для обеззараживания воздуха лаборатории должны быть оборудованы бактерицидными лампами.

3. Микологическая лаборатория

Работа с патологическим материалом, содержащим грибы должна проводиться с соблюдением особых правил техники безопасности, противоэпидемиологического режима, личной гигиены и быть направлена на обеспечение профилактики заражения, аллергизации персонала и распространения инфекций.

Микологическая лаборатория должна иметь определенный набор помещений, который включает: комнату для приема и регистрации материала; комнату для микроскопии; бокс-посевную, комнату для посева и работы с культурами; средоварочную комнату; автоклавную для стерилизации и уничтожения патологического материала и культур; моечную; препараторскую; кладовую; гардероб для одежды сотрудников; туалет.

Для работы в микологической лаборатории необходимо иметь: спиртовки или газовые горелки, микробиологические петли, эпиляционный пинцет для удаления пеньков волос, микологические лопаточки, которые служат для отделения грибковых культур от питательной среды, скальпель для забора соскобов с кожи и пораженных волос, шпатели, анатомические пинцеты, кусачки маникюрные, ножницы, ложечки Фолькмана, пипетки пастеровские, иглы препаровальные, пилку для ногтей; расщепляющие иглы для дробления чешуек кожи, стеклянные палочки, шприцы низкоскоростную центрифугу, аппарат для встряхивания, чашки Петри, пробирки, стеклянную посуду, ультрафиолетовую лампу Вуда с фильтром, микроскопы, осветители, термостаты, автоклавы, холодильники, сухожаровые шкафы, бактерицидные лампы.

Дрожжевые грибы принадлежат к возбудителям 3-4 групп а грибы, вызывающие гистоплазмоз, бластомикоз, кокцидиоидоз относятся к 2 группе патогенности.

Проводить работу с культурами грибов 4-й, 2-й, 3-й группы патогенности разрешается только на основании особого разрешения, с соблюдением инструкций по технике безопасности:

Если забор патологического материала проводят с ног, то используют специальную скамейку, покрытую клеенкой;

Салфетки, пелерины, используемые при заборе материала, подвергают обеззараживанию с использованием кипячения в течение 15 минут или полного погружения в дезраствор на 3 часа;

Исследуемый материал транспортируют в металлической или пластмассовой таре (ящики с крышками, биксы), которые ежедневно обрабатывают дезрастворами;

Посевы патологического материала необходимо проводить около газовой горелки. На засеянных чашках и пробирках необходимо ставить четкие, разборчивые надписи, в которых указывается дата посева, номер анализа;

Загрязненную в ходе исследования посуду (пипетки, шпатели, предметные стекла) необходимо подвергать обеззараживанию; для этого ее погружают в 5% раствор хлорамина или 5% раствор осветленной хлорной извести на 2-3 часа. После чего обеззараженную посуду подвергают мойке и кипячению;

Жидкий исследуемый материал (кровь, мочу, мокроту, промывные воды, фекалии смешивают с водой 1:1) засыпают хлорамином или хлорной известью 200г/л на 2 часа с последующей эвакуацией в канализацию.

Требования, предъявляемые при работе с возбудителями глубоких микозов.

Все работы с культурами мицелиальной фазы грибов проводят в боксе биологической безопасности III класса;

Просмотр посевов с мицелиальной фазой грибов проводят в боксовых комнатах в костюме 4 типа с ватно-марлевой повязкой;

Чтобы не заразиться аэрогенным путем при работе с мицелиальными фазами грибов агаровые пластинки с посевами выдерживают в термостатах не более 5 суток (до начала спороношения). Не разрешается открывать матрацы и пробирки с посевами мицелиальной фазы грибов вне бокса;

Работу с дрожжевыми фазами грибов проводят в боксовой комнате в костюме III типа с маской, серологические исследования - в костюме IV типа;